小編告訴你超濾離心管使用需注意這些
更新時間:2021-03-04 點擊次數:1117次
超濾離心管的膜材質是聚醚砜膜,截留分子量明確而準,物化性能穩定,蛋白吸附極低,產品回收率高。可以對病毒進行多倍甚至高倍濃縮,有專門針對病毒的膜,不同的病毒需要選擇合適的膜孔徑。超濾離心管在使用前應用純化水進行初離心,以驗證其完整性,每次使用完成后,要求濕態保存,防止膜干燥。
超濾離心管使用注意:
1、選擇合適的超濾管。通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。
2、新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量*過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、直接損壞超濾膜。要等離心機達到目的轉速之后,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法一時間處理。膜與轉軸的方向根據說明書調整。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管。離心過程中注意是否發生蛋白沉淀,導致堵管。若發生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適。